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關(guān)鍵詞:Sigma-Aldrich西格瑪中國(guó)
簡(jiǎn)介：我公司全國(guó)總代理,華東地區(qū)代理Sigma-Aldrich西格瑪中國(guó)專業(yè)經(jīng)營(yíng)進(jìn)口胎牛血清、細(xì)胞因子、ELISA試劑盒、細(xì)胞、抗體、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗、其產(chǎn)品吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高，代做ELISA實(shí)驗(yàn)等。
全國(guó)總代理,華東地區(qū)代理產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域。全國(guó)總代理,華東地區(qū)代理范圍內(nèi)免費(fèi)運(yùn)輸，如出現(xiàn)運(yùn)輸質(zhì)量問(wèn)題，我們可以包退換貨。完善的庫(kù)存及供應(yīng)體系以及高效穩(wěn)定的純化技術(shù)，保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應(yīng)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。
品牌名稱：  

測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程：
分子克隆的相關(guān)載體：DNA段的克隆需要合適的載體，載體或是質(zhì)粒，或是噬菌體，或是病毒，通常大多經(jīng)過(guò)人工改造。作為載體必須具備兩條件：一是該載體在細(xì)胞內(nèi)必須能自主復(fù)制，即必須具備復(fù)制原點(diǎn)；二是該載體必須具備適合的酶切位點(diǎn)，且這些酶切位點(diǎn)不在復(fù)制原點(diǎn)區(qū)域內(nèi)。以上兩條，保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽(yáng)隆克隆，載體上常有篩選標(biāo)記，如對(duì)抗菌素的抗性，某些基因產(chǎn)物的顯色反應(yīng)等。
服務(wù)要求： 
1、請(qǐng)以等形式告知我們服務(wù)的主要目的及具體要求。
2、提供外源DNA的來(lái)源及背景資料。DNA來(lái)源包括：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；RT－PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；從其它質(zhì)粒上酶切得到的DNA段等。
3、提供DNA段的電泳照片，并請(qǐng)標(biāo)明Marker有濃度。
4、提供載體來(lái)源與背景資料。
5、注明克隆使用的酶切位點(diǎn)以及是否需要平端連接等。
相關(guān)材料說(shuō)明： 
1、對(duì)于實(shí)驗(yàn)材料中涉及病原體等危險(xiǎn)材料不接受。
2、實(shí)驗(yàn)中涉及的堿基序列請(qǐng)以的形式發(fā)到我中心。
3、實(shí)驗(yàn)中的使用載體要盡量提供背景資料：（質(zhì)粒大小，抗性，拷貝數(shù)，多克隆位點(diǎn)等）如果是商品化載體，請(qǐng)您提供生產(chǎn)廠家及標(biāo)準(zhǔn)名稱；如果所提供載體是您自己構(gòu)建的請(qǐng)注明大體結(jié)構(gòu)情況。
4、我中心可以提供常用的如（氨芐青霉素，氯霉素，卡那霉素）以外的抗生素需您提供。
5、您自己提供的引物如果為干品，請(qǐng)您標(biāo)注具體的OD數(shù)，如果是液體態(tài)，請(qǐng)您標(biāo)明濃度。
6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。（同時(shí)提供相應(yīng)的質(zhì)粒）；如果提供質(zhì)粒，則質(zhì)粒的量在4ug以上；如果提供的是PCR產(chǎn)物，則PCR產(chǎn)物量在5u以上（附上電泳圖）
7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時(shí)應(yīng)首先在液氮中速凍，保存在－80度的冰箱中，使用干冰運(yùn)輸。
載體DNA的選擇 
分子克隆載體
①質(zhì)粒:質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外遺傳因子，DNA呈環(huán)狀，大小為1-200千堿基對(duì)(kb)。在細(xì)胞中以游離超螺旋狀存在，很容易制備。質(zhì)粒DNA可通過(guò)轉(zhuǎn)化引入寄主菌。在細(xì)胞中有兩種狀態(tài)，一是"緊密型";二是"松弛型"。此外還應(yīng)具有分子量小，易轉(zhuǎn)化，有一至多個(gè)選擇標(biāo)記的特點(diǎn)。質(zhì)粒型載體一般只能攜帶10kb以下的DNA段，適用于構(gòu)建原核生物基因文庫(kù)，cDNA庫(kù)和次級(jí)克隆。
②噬菌體DNA:常用的λ噬菌體的DNA是雙鏈，長(zhǎng)約49kb，約含50個(gè)基因，其中50%的基因?qū)κ删w的生長(zhǎng)和裂解寄主菌是必需的，分布在噬菌體DNA兩端。中間是非必需區(qū)，進(jìn)行改造后組建一系列具有不同特點(diǎn)的載體分子。λ載體系統(tǒng)zui適用于構(gòu)建真核生物基因文庫(kù)和cDNA庫(kù)。
M13噬菌體是一種*的載體系統(tǒng)，它只能侵襲具有F基因的大腸桿菌，但不裂解寄主菌。M13DNA(RF)在寄主菌內(nèi)是雙鏈環(huán)狀分子，象質(zhì)粒一樣自主復(fù)制，制備方法同質(zhì)粒。寄主菌可分泌含單鏈DNA的M13噬菌體，又能方便地制備單鏈DNA，用于DNA順序分析、定點(diǎn)突變和核酸雜交。
③柯斯(Cos)質(zhì)粒:是一類帶有噬菌體DNA粘性末端順序的質(zhì)粒DNA分子。是噬菌體-質(zhì)粒混合物。此類載體分子容量大，可攜帶45kb的外源DNA段。也能象一般質(zhì)粒一樣攜帶小片段DNA，直接轉(zhuǎn)化寄主菌。這類載體常被用來(lái)構(gòu)建高等生物基因文庫(kù)。
【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結(jié)合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結(jié)合物 半抗原反應(yīng) 半抗原載體結(jié)合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質(zhì)/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細(xì)菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細(xì)胞質(zhì)蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細(xì)胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細(xì)胞裂解 組織提取 重組細(xì)胞因子 
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學(xué)緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學(xué)試劑 其它生化試劑
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR試劑 PCR對(duì)照 特異性PCR試劑盒 PCR克隆試劑盒 RNA 載體及構(gòu)建 PCR克隆載體 M13克隆載體 細(xì)菌克隆載體 文庫(kù)及構(gòu)建 cDNA文庫(kù) 基因組文庫(kù) 噬菌體展示文庫(kù)
【酶】限制性內(nèi)切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 連接酶
【cDNA及合成純化】cDNA全長(zhǎng)基因 RNA cDNA合成 cDNA相關(guān)試劑
【核酸/蛋白合成】Oligo純化 核酸合成柱 核酸合成試劑
【克隆與表達(dá)】克隆基因 克隆試劑盒 克隆篩選
【表達(dá)分析】 Northern印跡分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝膠制備 蛋白電泳試劑 預(yù)制蛋白凝膠
【核酸純化】 DNA凝膠純化 DNA提取純化 PCR產(chǎn)物純化
【RNAi技術(shù)】 siRNA 反義寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文庫(kù)
【蛋白檢測(cè)】 Western印跡 報(bào)告基因檢測(cè) 蛋白檢測(cè)試劑盒
【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 小鼠 大鼠 模式動(dòng)物
【臨床檢測(cè)試劑】 生化檢測(cè) 遺傳學(xué)檢測(cè) 血液檢測(cè)
相關(guān)檢驗(yàn)